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纽荷尔细胞工厂观察显微镜实验涉及到的细胞学说内容
来源: | 作者:纽荷尔显微镜 | 发布时间 :2024-04-11 | 98 次浏览: | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ | 分享到:

细胞学说1.所有生物都由细胞和细胞的产物组成;(病毒除外)2.新的细胞必须经过已存在细胞的分裂而产生;3.每一个细胞可以是独立的生命单位,许多细胞又可以共同形成生物体或组织。


细胞的概念: 细胞是由细胞膜包围的,含有细胞核(或拟核)的原生质团组成的生物体最小单位。细胞是生命活动的基本单位细胞,具有独立完整的代谢体系,是代谢与功能的基本单位。细胞是遗传的基本单位,纽荷尔细胞工厂观察显微镜工厂,具有遗传的全能性。细胞是有机体生长与发育的基础。没有细胞就没有完整的生命。


非细胞的生命形态---病毒(前细胞形态):不具备细胞形态  有生命现象 可以进行自我复制  不能独立生活


原核细胞:(细菌、支原体) 具有一定细胞形态,无典型细胞核,结构简单,由细胞壁、细胞膜、细胞质及拟核组成,含有核糖体。


真核细胞: 具有一定细胞形态有完整的细胞核及核被膜 由细胞膜、细胞质及细胞核组成


细胞膜:是包围在细胞质表面的一层薄膜,又称质膜。细胞膜不仅是机械屏障,而且具有多 种复杂功能


细胞的内膜系统:指细胞内在结构、功能及发生上相关的由膜包绕形成的细胞器或细胞结构。 细胞内膜 + 质膜 =生物膜


成熟的红细胞:没有细胞器,质膜是它的唯一结构  红细胞膜(称为血影)是研究膜结构的良好材料


细胞膜的化学组成 主要 脂(50%)蛋白质(42%)糖(2~8%)水、无机盐 金属离子(少量)


膜脂:细胞膜上的脂类,构成细胞膜的基本骨架 类型:磷脂、胆固醇、糖脂,其中以磷脂含量最多。


磷脂的特点:1. 磷脂酰碱基+磷酸基团+甘油或鞘氨醇+脂肪酸烃链 2.双亲性分子: 亲水头+疏水尾 3.含两条烃链 (14-24 C),一条饱和,另一条不饱和4.磷脂构成膜脂的基本成分


胆固醇的特点: 双亲性分子,其极性头部为羟基团,疏水结构为固醇环与烃链,羟链尾部埋在脂双层中央。具有双重调节作用,即稳定膜和调节膜的流动性

糖脂的特点:糖基作为极性的头部,两条羟链为疏水的尾部。糖脂位于质膜非胞质面。两亲 性分子。糖脂由脂类和寡糖构成。


膜蛋白:细胞膜上的蛋白质,膜功能的执行者。分为类型: 跨膜蛋白、膜周蛋白、脂锚定蛋 白。在不同细胞中膜蛋白的含量及类型有很大的差异。


跨膜蛋白:占膜蛋白70%~80%。横跨全膜,胞外 + 跨膜 + 胞内三个结构域。两亲性分(胞内区、胞外区-极性;跨膜区-非极性)。类型:单次跨膜、多次跨膜和多亚基跨膜。


膜周蛋白:占膜蛋白20%~30%   分布在膜的内、外表面,与跨膜蛋白亲水区或脂分子极性 头部以非共价键连接,间接与膜结合。为水溶性蛋白,与膜结合较弱。列子:红细胞的血影蛋白和锚蛋白,细胞色素C。


脂锚定蛋白:分布在膜的内、外表面。与脂分子以共价键连接(与脂分子碳氢链的直接连接。位于胞质面, 与糖基化磷脂酰肌醇(GPI)的寡糖链结合,位于质膜外表面)


分离膜蛋白:破坏疏水作用,使用去垢剂,SDS(离子型)


膜糖:与脂和蛋白质形成糖脂和糖蛋白,质膜上所有的糖链朝向细胞表面。



细胞膜的特性:不对称性 


1.膜脂分布不对称 在膜内、外层中成分和含量比例不同,不同膜性细胞器中脂类成分是不同的。


2. 膜蛋白分布不对称  各种膜蛋白在质膜中都有一定的位置。 在膜内、外侧分布的区域性,跨膜蛋白的方向性(-N端和-C端)。


3. 膜糖分布不对称


4.脂双层侧向分布不对称(功能结构域)细胞膜上的功能性微结构域,如脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域。像一个蛋白质停泊的平台,与膜的信号转导、物质转运有关。


流动性  膜脂的流动性和膜蛋白的流动性。膜脂双分子层是二维流体,脂双层是“液晶态”的二维流体,分子排列的有序性和液体的流动性。


膜脂分子的5种运动 侧向扩散,翻转运动,旋转运动,伸缩和振荡运动,烃链的旋转异构运动

影响膜脂流动性的因素 脂肪酸链的饱和程度及其长度(含不饱和脂肪酸多,膜的流动性大

烃链的长度短,膜的流动性大), 胆固醇的双重调节作用(高于相变温度, 限制膜的流动性

低于相变温度, 防止膜流动性的突然降低),卵磷脂/鞘磷脂的比值(比值高,膜流动性大),膜蛋白的影响(嵌入蛋白多,膜流动性小)

膜蛋白的运动性(移动速率较脂分子慢) : 侧性扩散和旋转运动意义:膜的流动性是膜功能活动(物质运输、细胞识别、信号转导)的保证。

流动镶嵌模型 脂双层构成膜的连贯骨架,它具有晶体分子排列的有序性,又具有液体的流动体。膜中的蛋白质分子以不同形式与脂双分子层结合。膜具有不对称性和流动性。


简单扩散 小分子物质(如:气体)跨膜运输最简单的方式,由小分子的热运动来完成。特点:顺浓度梯度扩散,不需要提供能量,被动运输,没有膜蛋白的协助。条件:溶质在膜两侧保持一定的浓度差,溶质必须能透过膜。


膜运输蛋白  负责转运物质的膜蛋白,类型:载体蛋白,通道蛋白。特点:都是跨膜蛋白,每种膜运输蛋白只转运一种特定类型的分子。


载体蛋白  与特定的溶质结合,改变构象使溶质穿越细胞膜。具有特异性 (葡萄糖载体蛋白)。被动运输、主动运输 (ATP, Na+势能)。转运速率相对低,最大转运速率。


易化扩散:一些非脂溶性物质在载体蛋白的介导下,不消耗细胞的代谢能量,顺物质浓度梯度或电化学梯度进行转运。特点:顺浓度梯度转运,不需要提供能量,被动运输,需要载体蛋白协助。


Na+-K+泵 输出3个钠(磷酸化) 输入2个钾(去磷酸化)乌本甘(抑制剂)意义:维持细胞内低Na+高K+的特殊离子梯度,细胞代谢的需要。为其他物质运输提供Na+电化学势能。产生和维持膜电位(膜内电位负于膜外)。调节细胞的渗透压,保持细胞的容积。工作原理(磷酸化和去磷酸化)。

同向运输 物质跨膜转运方向与Na离子转运方向相同。


Na+电化学梯度驱动的葡萄糖泵 特点:葡萄糖逆浓度梯度转运。需要消耗能量(Na+电化学梯度)。需要载体蛋白协助。葡萄糖和Na+共转运的方向相同,为同向运输。主动运输.


Na+-Ca2+交换载体  特点:Ca2+逆浓度梯度转运。需要消耗能量(Na+电化学梯度)。需要载体蛋白协助。Ca2+和Na+共转运的方向相反,为对向运输。主动运输。


同向运输和对向运输的Na+电化学梯度由Na+-K+泵维持


通道蛋白 形成穿越质膜的亲水通道,能使适宜大小的分子及带电荷的离子通过脂双层, 也称为离子通道。特点:通道蛋白介导的是被动运输,顺浓度梯度自由扩散,在转运过程中不与溶质分子结合。对转运的离子的大小和所带的电荷有高度的选择性。转运速率高。不是持续开放。


离子通道的类型 配体门控通道【由配体与细胞表面受体结合来调控 如乙酰胆碱受体(2个结合位点)通道(Na+通过内流)】电压门控通道(受膜电位变化调控,存在于神经元、骨骼肌及腺体可兴奋细胞。如电压门控Na+通道)应力激活通道。


重点内容:蛋白质的分选机制-信号假说。1.内质网的主要功能。2.高尔基体的主要功能。


细胞内膜系统 指在结构,功能或发生上相关的细胞内膜形成的细胞器。细胞内膜系统包括核被膜、内质网、高尔基体及其形成的溶酶体和分泌泡等,以及其它细胞器如线粒体,质体和过氧化物酶体等膜包围的细胞器(膜性细胞器)。内膜系统是真核细胞所特有。


内质网(ER)结构:由单位膜形成的小管、小泡或扁囊构成的连续网状膜系统。类型:滑面内质网:多由分支小管或小泡构成, 表面无核糖体。粗面内质网:多由板层状排列的扁构成,表面附着核糖体。ER膜组成:脂类30-40%; 蛋白质 60-70% ER膜具有大量的酶,标志酶:葡萄糖-6-磷酸酶。


粗面内质网功能 作为核糖体附着的支架(外输性蛋白质,膜整合蛋白质,驻留蛋白)。新生多肽链的折叠与装配。蛋白质的糖基化【O-连接的糖基化,N-连接的糖基化(与肽链特定序列Asn-X-Ser或Asn-X-Thr中天冬酰胺残基的NH2 连接,糖为N-乙酰葡糖胺)】。蛋白质的胞内运输。  

  

滑面内质网的作用 合成磷脂、胆固醇等膜脂。解毒,如肝细胞的细胞色素P450酶系。糖原代谢 使葡糖6-磷酸水解,释放糖至血液中。储存钙离子,作为细胞内信号物质,如肌质网。参与胃酸、胆汁的合成和分泌。


高尔基复合体  由一些扁囊平行排列堆在一起形成的极性的膜性细胞器。


组成部分  顺面网状结构(接受由内质网合成的物质并分类后转入中间膜囊)中间膜囊(糖基修饰、糖酯形成和多糖的合成)反面网状结构(参与蛋白质的分类与包装,最后输出)


功能  参与蛋白质的分选、运输。糖蛋白的加工合成(糖基化修饰),蛋白质的水解加工(胰岛素原经转变酶至胰岛素)参与膜的转化,参与形成溶酶体。

特征性酶:糖基转移酶。


溶酶体 具有高度异质性的膜形结构细胞器 富含酸性水解酶的膜性囊。


类型 1. 初级溶酶体2. 次级溶酶体3.残留小体( 溶酶体内存在未被消化和分解的物质,如:脂褐体、含铁小体、多泡体和髓样结构。功能: 消化作用(细胞内的消化器官),对内源性和外源性物质的降解,纽荷尔细胞工厂观察显微镜工厂,参与组织器官变态和退化,如:蝌蚪变蛙、子宫内膜萎缩,受精,骨质更新。


蛋白质分选的基本原理  细胞内合成的蛋白质、脂类等物质之所以能够定向的转运到特定的细胞器取决于两个方面:1.蛋白质中的信号序列2.细胞器上的信号识别装置.


信号肽(signal peptide):存在于蛋白质一级结构上的线性序列,通常15-60个氨基酸残基,有些在完成蛋白质的定向转移后被信号肽酶切除;通常信号序列对所引导的蛋白质没有特异性要求,每一种信号序列决定特殊的蛋白质转运方向。


信号斑(signal patch):存在于完成折叠的蛋白质中,构成信号斑的信号序列之间可以不相邻,折叠在一起构成蛋白质分选的信号。


返回内质网    -Lys-Asp-Glu-Leu-COO-(KDEL)


线粒体是双层单位膜围成封闭囊状结构的细胞器,外膜,平整光滑, 有通道蛋白,可使MW小于10KD的分子通过。蛋白质/脂类=1:1,脂类磷脂总量约为内膜3倍,胆固醇总量约为内膜6倍。内膜,有皱折,内表面不光滑,有高度选择性,可使MW小于150的小分子通过,蛋白质/脂类=4:1,脂类心磷脂为其主要成分,胆固醇含量很少。基质 内腔中,成胶状,含有可溶性蛋白质、脂类、环状DNA分子和核糖体等


标志酶 外膜:合成线粒体脂类的酶,单胺氧化酶 内膜:细胞色素氧化酶、琥珀酸氧化酶


基质:丙酮酸氧化酶,苹果酸脱氢酶 膜间腔:腺苷酸激酶


mtDNA:  是双链环状的DNA分子、裸露不与组蛋白结合,分散在线粒体基质中,或与线粒体内膜结合.mtDNA排列紧凑、高效利用、可自我复制,双启动子转录,不含内含子,少有非编码区,mtDNA编码的蛋白质是在线粒体的核糖体上合成,mtDNA不含组蛋白,半保留复制,复制时期不仅局限在间期.


线粒体DNA的复制 轻链的复制晚于重链 重链顺时针复制,轻链逆时针复制 复制不受细胞周期的影响,可越过细胞周期的静止期或间期,甚至可分布在整个细胞周期。


线粒体DNA的转录 :类似于原核生物的转录,产生一个多顺反子,其中包括多个mRNA和tRNA,没有内含子,加“尾”,不加“帽”。


线粒体DNA的翻译 构成线粒体核糖体的蛋白质是由细胞质运入线粒体内。用于蛋白质合成的所有tRNA都是由mtDNA编码。密码子配对不严格。部分密码子有区别。UGA不是密码子,而是色氨酸的密码子。AGA和AGG由精氨酸的密码子变为终止密码子。翻译起始氨基酸为甲酰甲硫氨酸,与原核生物类似。


导肽牵引蛋白质穿膜进入线粒体几个特点:1.跨膜转运之前,蛋白质多以前体形式存在。 前体=成熟形式的蛋白质+N-末端导肽.2.蛋白质穿过线粒体内膜运送是一种需能过程,所需能量由内膜跨膜电位提供。3.蛋白质跨膜转运时,有受体参与。 4.导肽只决定运输方向,对被运蛋白质无选择性。5.从内外膜转位接触点运输时,蛋白呈解折叠状态。


线粒体的半自主性 线粒体含有自己的DNA,具有整套的遗传物质表达系统,能进行蛋白质合成,并将其遗传信息传给子线粒体,具自主性;但其结构、组分、生长、繁殖和氧化磷酸化等生命活动又是在核基因控制下实现的,因而是一个半自主性的细胞器。


线粒体通过分裂方式进行增殖 间壁分裂 出芽分裂 


转位接触点 在线粒体内、外膜之间形成的接触点,是蛋白质出入线粒体的通道


细胞骨架 真核细胞质中蛋白纤维网架体系,包括微管、微丝、中间纤维,功能:形态维持、运动和信息传递。


结构 -,-tubulin异二聚体首尾相接形成原纤维,13根纵行螺旋排列原纤维构成微管。普遍存在于真核细胞质,又是纤毛、鞭毛、中心体、纺锤体等的主要组成结构。中空管状结构


。-,-tubulin异二聚体具有极性,+极(plus end)生长速度快,-极(minus end)生长速度慢。


微管类型 单管   二联管   三联管  单管,主要存在形式,纺锤体,不稳定。二联管,纤毛、鞭毛,稳定。三联管,中心体及鞭毛和纤毛基体,稳定。


微管组织中心 微管聚合从特异性的核心形成位点开始,这些核心形成位点主要是中心体和纤毛的基体,成为微观组织中心。促进微管核心形成,稳定微管负端。



微管结合蛋白 结合在微管表面的辅助蛋白,两个结构域:①结合微管的结构域;②向外突出的结构域,主要功能:①促进微管聚集成束,增加微管稳定性或强度;②物质转运;③信号转导。种类 MAP-1(神经元轴突、树突)MAP-2(神经元树突、胞体)Tau  (神经元轴突)MAP-4(各类细胞)

中心体 位置:细胞核的附近,有丝分裂时位于细胞的两极。组成:两个中心粒和中心粒旁物质。决定微管形成,参与有丝分裂纺缍体的形成。


微管的组装条件 GTP浓度 微管蛋白临界浓度(临界浓度,1mg/ml)压力 温度(T﹥20℃,组装T<4℃,去组装) 离子浓度(Mg2+↑—促进,Ca2+↑—抑制和去组装) 药物(促组装:紫杉醇;去组装:秋水仙素、长春碱等)


微丝 是由肌动蛋白组成的细丝。普遍存在于真核细胞质。实心纤维丝状结构。电镜下细丝状结构。肌动蛋白首尾相接双股螺旋排列,具有极性。


影响条件  药物(促进:鬼笔环肽(phalloidin) 阻断:细胞松弛素B ) 阳离子浓度(Mg2+↑—促进。Na+,K+ ↑—促进。Ca2+↑—抑制)ATP。G-actin。

中间纤维  中间纤维蛋白形成的中空纤维结构


中间纤维的功能 网状骨架系统 机械强度支持 参与细胞连接 信息传递及物质运输 维持核膜稳定 (核纤层蛋白) 参与细胞分化 (组织特异性)


中间纤维组装特点 半分子长度交错原则,四聚体中两个二聚体反向平行,整条纤维不显极性 不需ATP或GTP参与 ,不依赖蛋白浓度和温度 ,无结合蛋白辅助 ,头尾非螺旋区具有稳定中间纤维和连接其它结构的作用。


细胞核由双层完整的膜组成的核被膜所包被,核被膜上有核孔,参与蛋白质和RNA的转运,细胞核包含的亚单位没有膜的界限,细胞核包含大部分DNA,涉及基因表达调控。


细胞核的形状和表型是区分不同细胞类型的两个要素。


外核膜 与内质网相连续,外表面附着核糖体,可见中间纤维、微管等

内核膜 朝向核质,表面光滑,内侧附着核纤层

核内间隙  与内质网膜间腔相通,含多种蛋白质和酶

核纤层 核纤层由被称为核纤层蛋白的中间纤维蛋白构成,位于核内膜下与核膜相连接,提供物理支撑/重建核被膜,核纤层与染色质相互作用,有利于核纤层组织DNA复制。

核纤层蛋白病 病因:核纤层蛋白A缺失/突变



端粒是染色体末端的DNA重复序列。端粒DNA和端粒结构蛋白组成的染色体端部特化结构,高度保守,端粒封闭染色体末端,防止染色体相互融合,与核被膜相连,保护染色体不被核酸酶降解,为端粒酶提供底物。人体细胞中序列为GGGTAA。端粒酶促进端粒结构的稳定性,端粒酶含端粒DNA互补的RNA和蛋白质组成,合成端粒。


核小体(nucleosome)是染色质基本结构单位是组成真核生物染色质(除精子染色质外)的基本单位。核小体是由DNA与4对组织蛋白(共8个)的复合物,其中有H2A和H2B的二聚体两组以及H3和H4的二聚体两组。另外还有一种H1负责连结两个核小体之间的DNA。


核仁 核仁是核糖体RNA加工合成及亚单位装配的场所;核仁没有膜结构; 核仁是一种高度动态性结构,被认为是在rRNA基因聚集时发生;


染色质的一级结构 核小体 (7 fold)二级结构 螺线管 (6 fold)三级结构超螺线管 (40 fold)


四级结构染色单体 (5 fold)


核定位信号(NLS):在蛋白质中由氨基酸构成的短链结构,可以使该蛋白质定位于细胞核,通常为4~8个氨基酸组成的短肽,可分布于多肽序列的任何部分。不同亲核蛋白的入核信号氨基酸组成有差异,但均富含赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)和脯氨酸(Pro) 等碱性氨基酸。


核输出 信号(NES):出核信号;富含亮氨酸(Leu)的氨基短链是最普便的细胞核输出序列;


核型 指一个体细胞的全部染色体在有丝分裂中期的表型,包括数目、大小和形态特征


核基质 充满间期细胞核的、由非组蛋白组成的纤维网架结构 组成,非组蛋白性纤维蛋白 含硫蛋白(形成二硫键具有维持核骨架结构完整性的作用) 肌动蛋白和波形蛋白(后者构成核骨架的外罩)支架蛋白,少量RNA和DNA,少量磷脂和糖类。功能,核骨架是DNA复制的支架 是基因转录加工的场所 与染色体构建有关


染色体具有显带特性 带比带间的显色暗 在富含GC的带间,基因比较密集


次缢痕 染色体上的一个缢缩部位


核仁组织区 含有rRNA基因的一段染色体区域,该部位rRNA基因转录活跃,是染色质凝集程度低,表现为浅染的次缢痕,与核仁形成有关。但并非所有的次缢痕都是在核仁组织区



细胞连接 各种组织中的细胞按一定的排列方式互相接触, 相邻细胞表面形成的各种连接装置。


细胞表面的特化结构 微绒毛、褶皱、内褶、纤毛、鞭毛等。


细胞外基质的主要组成 氨基聚糖和蛋白聚糖 胶原和弹性蛋白 纤粘连蛋白和层粘连蛋白


氨基聚糖和蛋白聚糖的功能  使组织具有弹性和抗压性,对物质转运有选择渗透性,细胞表面的PG有信息传递的作用,角膜中的PG具有透光性,抗凝血(GAG),GAG和PG与组织老化相关


基底膜 细胞外基质的特化结构,组成:Ⅳ型胶原(不含规则的三肽重复序列Gly-X-Y,不形成α螺旋结构,以二聚体的形式装配成高级结构),层粘连蛋白,内联蛋白(在层粘连蛋白和胶原间搭桥),渗滤素。


细胞外基质和细胞的相互作用


1、细胞外基质的作用  使组织具有延展性(ductility)、弹性(elasticity)和减震性, 影响细胞的生存、生长和死亡,影响细胞的形态,影响细胞的分化,影响细胞的迁移。


2、细胞对外基质的作用 细胞是细胞外基质的产生来源,不同细胞外基质差异性产生取决于来源细胞性质和功能状态,细胞外基质成分的降解受细胞的控制


细胞分裂的形式 无丝分裂 有丝分裂  减数分裂


无丝分裂 核膜不消失,分裂速度快,耗能少,不出现有丝分裂器,细胞功能不受影响,但物质分配不均等


有丝分裂,又称间接分裂,真核细胞的主要增殖方式,主要特点:能把复制的两套遗传物质均等地分配给子细胞,以保证遗传的连续性和稳定性。


前期 染色质凝集 分裂极确定 核膜破裂 核仁解体 纺锤体形成(出现前期末,星体微管,动粒微管和重叠微管纵向排列构成。)


中期 纺锤体和赤道板形成 染色体达到最大程度的凝集


有丝分裂器 纺锤体﹑染色体﹑中心体共同组成临时结构。执行有丝分裂功能,确保两套染色体均等地分配给两个子细胞。


后期 着丝粒断裂,姊妹染色单体分离并移向细胞两极


向极运动: 姐妹染色体沿着动粒微管移向两极,形成数目相等的两组子染色体,分别集中于细胞的两端。(动力蛋白和驱动蛋白参与)


末期 细胞质分裂,形成两个子细胞;染色体解螺旋成染色质;核膜﹑核仁重新出现;纺锤体消失。收缩环(肌动蛋白+肌球蛋白 )


减数分裂,又称成熟分裂,是有性生殖个体形成生殖细胞的特有分裂方式。主要特点:染色体只复制一次,而细胞分裂两次,结果使子细胞中染色体数目只有母细胞的1/2,产生遗传多样性。


第一次减数分裂 染色质凝集,纺锤体形成,核被膜破裂,核仁消失,同源染色体配对


前期 细线期

   偶线期 同源染色体配对,联会现象出现

   粗线期 出现四分体,同源染色体出现交叉现象 

        四分体:每个二价体有紧密结合在一起的四条染色单体组成。

   双线期 联会复合体消失,出现端化现象。

   终变期 染色体再凝集,纺锤体形成,核膜破裂。


中期 后期 末期 :细胞一分为二,染色体数目减半

减数分裂间期 无新DNA合成,只进行动粒组装和中心体复制

第二次减数分裂    和有丝分裂过程相同。  


同源染色体 指一条来自父方,一条来自母方,大小、形态相同,并载有成对基因的一对染色体。


联会 同源染色体之间在相同位点上准确地配对过程。


联会复合体:两条同源染色体联会时并不完全融合,存在一个间隔区,此区内有一种由蛋白质组成的临时性结构,具有使同源染色体配对和重组的功能,称为联会复合体。


二价染色体:配对靠拢的两条同源染色体


细胞周期 指连续分裂的细胞从上次分裂结束起,到下次分裂结束所经历的全部过程。


细胞周期时间 指细胞周期所持续的时间 Tc=TG1+TS+TG2+TM


G1期 (DNA合成前期) DNA复制的准备期


主要进行RNA和蛋白质合成


G1早期细胞生长,合成大量RNA、蛋白质,形成大量细胞器,细胞体积增大、核质比增加


G1晚期为S期DNA合成作准备,合成DNA复制所需核苷酸、聚合酶、解旋酶、细胞周期蛋白等


S期 (DNA合成期) 完成DNA复制,蛋白质合成(组蛋白、DNA聚合酶等),中心粒复制


G2期 (DNA合成后期) 细胞分裂的准备期,纽荷尔细胞工厂观察显微镜工厂,进入M期所需RNA、蛋白质合成,成熟促进因子,与纺锤体形成有关的细胞骨架蛋白,中心粒分离并向细胞两极移动,DNA合成停止


M期 (有丝分裂期)  细胞进行分裂,蛋白质、RNA合成抑制,染色质组装成染色体,有丝分裂器和收缩环的形成,核被膜和核仁的消失和重建


细胞分裂 定义:一个亲代细胞形成两个子代细胞的过程 功能:细胞生命活动的重要特征,多细胞生物个体生长的基础,维持和更新个体正常组织



电子显微镜  光源:电子束 分辨率:0.2 nm


          应用: 细胞器的微细结构(亚显微结构或超微结构)标本表面的三维立体形态


          类型:透射电镜(细胞亚显微结构)、扫描电镜(细胞表面立体结构)


纳米显微技术 类型:扫描隧道显微镜、原子力显微镜(对单个分子进行操控)


            应用:观察样品表面原子水平的微细结构


RNA干涉  用小RNA对目标mRNA高效和特异的抑制作用, 又称基因沉默技术。


细胞分离的原则  等渗溶液、低温环境、无菌操作


差速离心法:不同离心力 。分离质量、体积差别较大的颗粒,离心时间短,细胞损伤小,抽提量小,适用于分析分离  


密度梯度离心法:不同介质。细胞组分分离产物多,适用于制备分离


免疫磁珠法  特异性高,细胞回收率>90%,细胞保持活性


流式细胞术  特异性高,细胞纯度>95%,细胞活性>95%,有荧光的液滴带负电


细胞培养  指从活体组织分离出特定的细胞,在一定的条件下进行培养,使之能继续生存、增殖的一种方法。细胞培养条件 培养基 合适的环境 无菌和无毒

原代培养(Primary culture):从供体取得组织细胞后在体外进行的首次培养。


传代培养(Subculture):把原代培养的细胞从培养瓶中取出,以一定比例进行的扩大培养。


光学显微镜 普通光学显微镜 分辨率 0.2 µm


          荧光显微镜  细胞内几种抗原定性、定位、定量


          相差显微镜  观察体外培养的活细胞(不用染色)


          激光扫描共聚焦显微镜  三维影像、分子共定位


          暗视野显微镜   散射光成像


分辨率(Resolution):能够分辨两个质点的最小间距。